分光光度計是利用分光光度法,通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度,對該物質進行定性和定量分析。不同種類的分光光度計的基本原理相似,都是利用一個可以產生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產生特定波長的光源。光源透過測試的樣品后,部分光源被吸收,通過測量樣品的吸光值,經過計算可以轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
分光光度計的檢驗小妙招:
1.波長準確度的檢驗:
分光光度計在使用過程中,由于機械振動、溫度變化、燈絲變形、燈座松動或更換燈泡等原因,經常會出現(xiàn)刻度盤上的讀數(shù)與實際通過溶液的波長不符合的現(xiàn)象,因而導致儀器靈明度降低,影響測定結果的精度,需要進行檢驗。
檢驗波長準確度簡單的方法是用干涉濾光片或鐠釹濾光片測量儀器的吸收峰值,如果測出的值與濾光片標準值之差超出規(guī)程規(guī)定,則需要進行波長調節(jié)。
2.透射比正確度的檢驗:
用透射比標準值分別為10%、20%、30%左右的光譜中性濾光片,可見光區(qū)分別在440、546、635nm波長處,以空氣為參比,分別測量各濾光片的透射比,紫外光區(qū)用重鉻酸鉀溶液分別在235、257、313、350nm波長處,以高氯酸溶液為參比,測量其透射比。
3.穩(wěn)定度的檢驗:
在零點不受光的條件下,用零點調節(jié)器將儀器調至零點,觀察3分鐘讀取透射比的變化,即為零點穩(wěn)定性。在儀器測量范圍兩端向中間靠10nm處,調節(jié)零點后,蓋上樣品室蓋(打開光門),使光電管受光,調節(jié)透射比為95%(數(shù)顯儀器調至100%)察3分鐘讀取透射比的變化,為光電流穩(wěn)定性。
4.光的檢驗:
分光光度計棱鏡式儀器在420nm處,光柵式儀器在360nm處,紫外分光計在220nm處分別用符合規(guī)定的截止濾光片,以空氣為參比,測量其透射比值,即為儀器在相應波長下的雜散輻射率。
分光光度計廣泛應用于醫(yī)藥衛(wèi)生、臨床檢驗、生物化學、石油化工、環(huán)境保護、質量控制、司法刑偵、檢驗檢疫林業(yè)、地質勘探、食品檢測等行業(yè),是理化實驗室常用的分析儀器之一。